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La detección UV/VIS es una de las técnicas de detección más sensibles de la cromatografía en la gama de las trazas. Sin embargo, a veces, a la detección espectrofotométrica le falta sensibilidad, selectividad o reproducibilidad, y se necesitan derivatizaciones. Usando el robusto y versátil reactor de flujo continuo de Metrohm, se pueden efectuar derivatizaciones de uno o varios pasos de forma totalmente automática, tanto en modo pre-columna o post-columna y a cualquier temperatura entre 25 y 120 °C. La variable geometría del reactor permite ajustar el tiempo de residencia en el reactor de los reactivos según la cinética de derivatización. La flexibilidad del reactor se demuestra optimizando cuatro técnicas de post-columna generalizadas: la reacción relativamente lenta de la ninhidrina con aminoácidos y las rápidas derivatizaciones del silicato, bromato y cromato(VI).

Se desarrolló un sistema automatizado de alto rendimiento para determinar el pH del medio de cultivo utilizando un módulo de pH equipado con una celda de flujo continuo externa. Se desarrolló una aguja de perforación de septos y ventilación personalizada para tener en cuenta la forma y el tamaño de los recipientes de muestra del cliente. Para esta aplicación se necesitaban medidas de pH tanto precisas como exactas. Los datos presentados en este documento fueron recogidos por un cliente como parte de su proceso de validación y se proporcionaron para el uso con su consentimiento.

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Determinación de lisina y de sodio, amonio, potasio y calcio en lisina usando la cromatografía de cationes con detección de conductividad directa.

La supresión secuencial en la cromatografía catiónica mejora significativamente los límites de detección. Para que se alcancen límites tan bajos de detección, es esencial la determinación de los valores blancos de los recipientes de muestra empleados. Las pruebas de lixiviación de diferentes recipientes de muestra se consiguen con un proceso inteligente de enriquecimiento, mediante la eliminación de la matriz en la columna Metrosep C Supp 1- 250/4.0 con detección de conductividad, después de la supresión secuencial. Los matraces Corning® Cell Culture de 50 mL de Sigma-Aldrich (CLS430168) muestran los valores blancos más bajos.

Alamar Blue se controla con espectroelectroquímica de fluorescencia durante su reducción irreversible a resorufina y su posterior reducción reversible a dihidroresorufina.

Determinación de acetato, cloruro, citrato y sulfato en un concentrado de una solución de infusión, usando la cromatografía de aniones con detección de conductividad directa. La CI sin supresión se usa para evitar interferencias de los aminoácidos.

Un gradiente de baja presión permite la separación de los azúcares y los ácidos del azúcar retenidos en gran medida en la columna en un tiempo de análisis razonable. La separación de los sacáridos se consigue mediante una columna como la Metrosep Carb 2 - 250/4,0 y, a continuación, la detección amperométrica pulsada (PAD, por sus siglas en inglés). En las condiciones seleccionadas, la galactosa y la arabinosa no se separan completamente.

Esta Application Note describe la separación de inositol, manitol, glucosa, xilosa, fructosa, lactosa, sacarosa y celobiosa mediante una columna como la Metrosep Carb 2 - 150/4,0 y, a continuación, la detección amperométrica pulsada (PAD, por sus siglas en inglés).

La separación de lactosa, ácido lactobiónico, ácido siálico*, 6'-sialilactosa y 3'-sialilactosa se muestra como prueba de concepto para el control de estos componentes en el proceso de fermentación de un producto farmacéutico. Se alcanza el criterio de aceptación de una resolución mínima de los picos (< 1,3). La separación se lleva a cabo en una columna Metrosep Carb 2 - 250/4,0 con detección amperométrica pulsada posterior.

Es posible realizar un análisis preciso de agentes complejos en baños galvánicos con la espectroscopia Raman en línea. Esta nota de aplicación muestra un ejemplo utilizando un analizador Raman 2060.

La baja sensibilidad ha limitado el uso de la espectroscopia Raman como método de detección. Sin embargo, el efecto de dispersión Raman mejorada en superficie (SERS) ha mejorado su eficacia para uso analítico. La aldehído deshidrogenasa (ALDH) y el citocromo c se analizan mediante espectroelectroquímica Raman como prueba de concepto en esta nota de aplicación.

Determinación de fluoruro, cloruro, fosfato y monofluorofosfato en monofluorofosfato de glutamina, usando la cromatografía de aniones con detección de conductividad después de supresión química.

Determinación de cloruro, nitrato, fosfato y sulfato en fórmula proteica, usando la cromatografía de aniones con detección de conductividad después de supresión química y diálisis para preparación de muestras.

Determinación de α-glicerolfosfato y β-glicerolfosfato en aminoácidos mediante cromatografía de aniones y detección de conductividad después de supresión química.

Determinación de fluoruro, cloruro, bromuro, nitrato, sulfato y trifluoracetato (TFA) en una muestra de péptidos mediante cromatografía de aniones y detección de conductividad después de supresión química.

La espectroelectroquímica in situ proporciona información electroquímica y espectroscópica dinámica al mismo tiempo que la reacción redox que ocurre en la superficie del electrodo. Aunque se pueden utilizar diferentes configuraciones espectroelectroquímicas, ecuaciones simples explican cómo relacionar la electroquímica y la espectroscopia para cada configuración experimental. Esta nota de aplicación describe cómo se calcula la cuantificación de un parámetro electroquímico (el coeficiente de difusión) a partir de los datos espectroscópicos como prueba de este concepto.

El valor FOS/TAC, a veces denominado VFA/TA, es un parámetro significativo para evaluar tanto las condiciones actuales como el desarrollo de los procesos de digestión anaeróbica en un digestor de una planta de biogás. Conocer este valor puede ayudar a disminuir el riesgo de problemas de acidificación, que pueden llegar a provocar una costosa parada de todo el proceso de digestión. Por ello, una determinación precisa y fiable del valor FOS/TAC es importante para realizar operaciones de producción eficientes y rentables. Este valor se determina mediante una titulación ácido-base. Con el Eco Titrator de Metrohm, equipado con un electrodo Ecotrode plus, es posible realizar una determinación reproducible y precisa del valor FOS/TAC.

El lactato de sodio es una forma de sal de ácido láctico que se usa en muchas industrias reguladas; por lo tanto, se requiere una determinación precisa del contenido de lactato y ya está cubierto por varias normas. Una de estas monografías de la Farmacopea de EE. UU. (USP) da como resultado altas precisiones y curvas de titulación bien definidas, pero utiliza reactivos de valoración y disolventes que son más costosos de lo necesario. En comparación, el método modificado presentado de Metrohm requiere una mezcla 1:1 de agua y acetona y utiliza ácido clorhídrico acuoso como valorante, lo que da como resultado una reducción de costos estimada del 40 % por valoración en comparación con el método USP (USP–NF 2021, número 2). Además, el tiempo necesario para cada análisis se reduce a solo el 12% del método USP (excluyendo la determinación del valor blanco). Esta nota de aplicación presenta ambos métodos para determinar el contenido de lactato y muestra los resultados obtenidos en un sistema OMNIS.

La determinación de aminoácidos es relevante para aplicaciones farmacéuticas y bioquímicas. El ejemplo aquí descrito muestra cómo un aminoácido binario de gradiente 17 separa una solución patrón habitual. La reacción post-columna con ninhidrina se produce a una temperatura de 120 °C. Las muestras sensibles a la temperatura deben refrigerarse.

Los medios de cultivo celulares contienen todos los componentes vitales de las células. En esta aplicación se determinó la composición de los aminoácidos cuando un gradiente binario los divide. La reacción post-columna con ninhidrina se produce a una temperatura de 120 °C. Las muestras sensibles a la temperatura deben refrigerarse.

Determinación de aluminio con Eriochrome Blue Black R a 60 °C en liofilisato proteico después de digestión húmeda.

Determinación de cisteína y cistina en caseinato después de preparación de muestras con NaOH.

La espectroscopía Raman es una técnica espectroscópica muy adecuada para el desarrollo y control de procesos en laboratorios de desarrollo de la industria química, farmacéutica entre otras. Este artículo demuestra la utilidad de la espectroscopía Raman portátil como una herramienta simple y versátil para la monitorización in situ de reacciones utilizando técnicas de análisis univariante como la tendencia de picos, así como enfoques de análisis multivariante para predecir el punto final de las reacciones químicas.

Mediante la unión de la cromatografía iónica y la espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP/MS) se crea un eficiente sistema de medida con el que se dominan algunos de los análisis particularmente exigentes. Por ejemplo, permite la determinación de la composición elemental, los estados de oxidación y los enlaces químicos de manera fiable. Esta información es necesaria, entre otros fines, para evaluar la toxicidad de los medicamentos, y de muestras medioambientales y de agua, así como la toxicidad de alimentos y bebidas.

La fermentación del almidón de maíz para producir etanol es un proceso bioquímico complejo que requiere la monitorización de muchos parámetros diferentes (por ejemplo, sólidos, pH, perfil de azúcar, glicerol, ácido láctico y acético, y contenido de agua y etanol). Los análisis tradicionales de laboratorio que utilizan métodos primarios (por ejemplo, la titulación Karl Fischer) tardan aproximadamente una hora en completarse y son un paso limitante para aumentar la capacidad y la eficiencia de la planta. Como técnica analítica rápida y no destructiva, la espectroscopía del infrarrojo cercano (NIRS) puede sustituir a los análisis rutinarios de laboratorio, disminuyendo los costes operativos y aumentando la eficiencia y la capacidad de la planta. Este documento técnico describe las capacidades del moderno método analítico de espectroscopía del infrarrojo cercano (NIR) para monitorizar y mejorar el proceso de fermentación del maíz destinado a la producción de etanol.

Este informe técnico se centra en aplicaciones IC-MS seleccionadas para la identificación y cuantificación sencillas de ácidos orgánicos y aniones inorgánicos en diferentes matrices.

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