Быстрый и надежный анализ стула с помощью БИК-спектроскопии
9 янв. 2023 г.
Статья
Несмотря на различия, у всех нас есть кое-что общее: мы все потребляем пищу и в результате выделяем отходы. Фраза «ты то, что ты ешь» безусловно применима при обсуждении темы анализа кала. Биомедицинские лаборатории оборудованы для тестирования образцов стула с целью диагностики ряда заболеваний и других проблем, хотя обычные процедуры подготовки и анализа образцов могут быть довольно утомительными и занимать много времени. Используя спектроскопию в ближней инфракрасной области спектра (БИК) в качестве аналитического метода, лаборатории могут получать быстрые и надежные результаты без подготовки образцов.
Определение содержания жира, азота и сухого вещества без пробоподготовки
Было доказано, что анализатор твердых веществ Metrohm NIRS DS2500 является ценным прибором для простых и надежных анализов стула в биомедицинских лабораториях. Азот и жир в фекалиях, сухое вещество и многие другие ключевые параметры могут быть количественно определены с помощью БИК менее чем за минуту без какой-либо пробоподготовки.
Доктор Лоуренс Барбо-Тристрам из университетской больницы University Hospital Pitié Salpêtrière - Charles Foix (AP-HP Paris, Франция) — медицинский биолог и кхн фармацевт по специальности биохимия. Она использует прибор в своей повседневной работе и согласилась поделиться своим опытом. Мы задали ей несколько вопросов о ее работе и впечатлениях от использования анализатора Metrohm NIRS DS2500 для анализа стула.
Нажмите по ссылке, чтобы перейти сразу к теме.
- Д-р Барбо-Тристрам, не могли бы вы вкратце описать вашу лабораторию?
- Какова ваша роль в лаборатории функциональной копрологии?
- Какие анализы проводятся в лаборатории функциональной копрологии?
- Что убедило вас выбрать БИК спектроскопию для анализа в вашей лаборатории?
- Краткое введение в БИК-спектроскопию
- Какие трудности вам пришлось преодолеть при внедрении метода БИК?
- Почему вы выбрали Metrohm в качестве поставщика БИК-анализатора?
- Где вы используете анализатор твердых тел Metrohm NIRS DS2500?
- Пробоподготовка с помощью БИК-спектроскопии
- Каково ваше профессиональное мнение об использовании анализатора NIRS DS2500 для анализа стула?
1. Доктор Барбо-Тристрам, не могли бы вы вкратце описать вашу лабораторию?
Лабораторию функциональной копрологии возглавляет профессор Натали Капель в отделении «BioGeM» университетской клиники University Hospital Pitié Salpêtrière - Charles Foix. Она признана во Франции эталонной лабораторией для биохимического исследования стула и исследования гомеостаза кишечника (например, всасывания питательных веществ, секреции электролитов, фекальных биомаркеров и продукции бактериальных метаболитов).
2. Какова ваша роль в лаборатории функциональной копрологии?
Как биолог я участвую в разработке и проверке новых методов. Кроме того, я участвую в медицинском подтверждении результатов. Это включает в себя не только критический аналитический взгляд на результаты, но и медицинскую интерпретацию, основанную на сопоставлении качественных и количественных данных с данными истории болезни и симптомами пациента.
Я также отвечаю за процесс обеспечения качества и валидацию методов в соответствии с аккредитацией ISO 15189 в сотрудничестве с другими медицинскими биологами и технической командой.
3. Какие анализы проводятся в лаборатории функциональной копрологии?
Мы анализируем несколько параметров в образцах стула. К ним относятся липиды, азот, углеводы, энергия, бактериальные метаболиты, электролиты, кальпротектин и эластаза. Такие анализы помогают нам:
- выявить механизмы хронической диареи
- исследовать изменения пищеварительных функций (например, мальабсорбцию)
- различать органические и неорганические симптомы (т. е. физически/биохимически проявляющиеся симптомы с измеримыми биомаркерами по сравнению с поведенчески/функциональными симптомами, которые сложнее диагностировать)
- изучить серьезность различных проблем, а также оценить и адаптировать лечение (медикаментозное и/или диетическое)
4. Что убедило вас выбрать спектроскопию ближнего инфракрасного диапазона (NIRS) для анализа в вашей лаборатории?
Эталонные методы измерения содержания воды, липидов (жиров) и азота в стуле в основном выполняются вручную и требуют много времени. Они требуют длительного процесса экстракции, что приводит к проведению серийных анализов. Поэтому мы искали более быстрый аналитический метод, который позволял бы отображать результаты на разовой основе. Мы также хотели ограничить использование растворителей и упростить подготовку образцов. Технология спектроскопии ближнего инфракрасного диапазона (БИК) соответствует этим требованиям.
Мы выбрали БИК по нескольким причинам: аспект гигиены, его полная автоматизация, облегчающая работу техников, и скорость дозирования, позволяющая ежедневно проводить анализ. Более того, этот метод анализа дает одновременно три результата (т. е. липиды, азот и гидратация) для одного и того же образца.
5. Краткое введение в БИК-спектроскопию
Взаимодействие света и материи — хорошо известный процесс. Свет, используемый в спектроскопических методах, обычно описывается не приложенной энергией, а длиной волны или волновыми числами.
БИК-спектрометр, такой как, анализатор твердых веществ Metrohm DS2500 Solid Analyzer, измеряет это взаимодействие для создания спектров, показанных на Рисунке 1. БИК-спектрометр особенно чувствителен к присутствию определенных функциональных групп, таких как -CH, -NH, -OH и -SH.
6. Какие трудности вам пришлось преодолеть при внедрении метода БИК?
Мы протестировали многие БИК анализаторы предыдущего поколения от других производителей, но результаты не были удовлетворительными, особенно для патологических образцов — либо водянистого, либо жирного стула. Поэтому мы были очень заинтересованы в оценке анализатора NIRS DS2500 от Metrohm с новым программным обеспечением для математической обработки, но нам нужно было убедиться в его эффективности для всех видов образцов (как нормальных, так и патологических).
7. Почему вы выбрали Metrohm в качестве поставщика БИК-анализатора?
Мы выбрали Metrohm, потому что это и поставщик, и производитель. Это позволяет нам получать прямую поддержку от компании в наших процессах разработки и валидации. Такая связь имеет решающее значение для внедрения новых автоматизированных процессов, полностью изменяющих наши прежние практики. Среди всех БИК анализаторов, которые мы пробовали, анализатор DS2500 Solid Analyzer лучше всего подходит для анализа наших образцов.
Сотрудничество между инженерами Metrohm и командой лаборатории было необходимо для проверки метода на патологических образцах (например, водянистых, жирных и т. д.).
We chose Metrohm because it is both the supplier and the manufacturer. This allows us to have direct support from the company for our development and validation processes.
Dr. Laurence Barbot-Trystram,
Medical biologist, Ph.D. pharmacist at University Hospital Pitié Salpêtrière - Charles Foix
Предварительные калибровки предлагают готовый к использованию БИК-анализатор для анализа стула с самого начала:
Основываясь на данных, полученных от нескольких пользователей, использующих анализатор NIRS DS2500 Solid Analyzer для анализа стула, Metrohm может предложить предварительно откалиброванные инструменты для непосредственного использования.
Анализы кала, выполняемые на анализаторе NIRS DS2500 Solid Analyzer (липиды, азот, сухая масса), выполняются в двух областях:
- Стандартный раздел, в котором сгруппированы основные биологические анализы, выполняемые для исследования диареи (измерения питательных веществ, электролитов и метаболитов).
- Специализированный сектор, посвященный оценке питания и последующему наблюдению за пациентами, перенесшими операции на пищеварительном тракте, такие как обширная резекция кишечника, ведущая к мальабсорбции, и состояния истощения, ведущие к кишечной недостаточности, шунтированию или даже трансплантации кишечника.
Измерение проводится очень просто. Образец хранится в соответствующей ячейке для образцов (например, в чашке Петри), которая помещается на анализатор. Образцы стула идеально анализируются в режиме диффузного отражения. Свет, отраженный от образца, собирается анализатором и используется для анализа.
Узнайте больше о различных режимах измерения для всех типов образцов в нашей статье ниже.
10. Каково ваше профессиональное мнение об использовании анализатора твердых тел NIRS DS2500 для анализа стула?
Переход от других технологий к БИК анализатору NIRS DS2500 стал настоящим испытанием для нашей команды, поскольку мы перешли от классических аналитических методов к физическим, связанным с математической обработкой. Это привело к интересному обмену мнениями внутри всей команды, от техников до биологов.
Однако анализатор NIRS DS2500 Solid Analyzer экономит время на техническом уровне (например, подготовка образцов, измерение, обслуживание анализатора), позволяя ускорить медицинскую валидацию и в целом сократить время обработки результатов врачами.
Программное обеспечение удобно для пользователя, а пробоподготовка проста для понимания. Мы без труда обучили несколько человек, в том числе коллег без лабораторного опыта.
Поскольку анализ является неразрушающим, при необходимости образец можно извлечь для других анализов, что в некоторых случаях может быть полезно.
Простота использования не должна заставить нас забыть о необходимости критического взгляда на результаты. Этот спектроскопический метод не является классическим в биологии — прежде чем приступить к рутинной реализации, необходимо сначала рассмотреть все особенности.
Among all the NIRS analyzers we tried, the NIRS DS2500 Solid Analyzer is the best suited to analyze fecal samples.
Dr. Laurence Barbot-Trystram,
Medical biologist, Ph.D. pharmacist at University Hospital Pitié Salpêtrière - Charles Foix
Спасибо, доктор Лоуренс Барбо-Тристрам, за то, что поделились мыслями о своей работе. Мы признательны за рассказ о вашем опыте внедрения спектроскопии ближнего инфракрасного диапазона в вашу лабораторию для анализа образцов фекалий человека.
Your knowledge take-aways
Brochure: Pre-calibration for the analysis of human stool
Pre-calibrations for Vision Air Vis-NIR spectroscopy software